（2）标准曲线的制作
精密称取利血平对照品5 mg，置100 mL量瓶中，加氯仿稀释至刻度，摇匀，分别精密移取1、2、3、4、5 mL于10mL容量瓶中，加氯仿稀释至刻度，摇匀，在254 nm处测定吸光度，以吸光度与利血平质量浓度回归，得回归方程：Y=-0.0016+25.093X（R=0.9996），线性范围为0.5～15 mg／L-1。
（3）样品分析方法
收集不同条件下所得萃取产物，减压回收夹带剂，得浸膏，称取萃取物10mg于100mL容量瓶中，流动相溶解并定容至刻度，得样品溶液。微孔滤膜 （0.45 μm）过滤后测定利血平的含量。
（4）回收率实验
称取样品6份，置100 mL容量瓶中，分别精密加入利血平对照品溶液，加氯仿稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件测定，平均回收率为99.01％，相对标准偏差为1.51%。
1.2.3 放大实验
取2kg粉碎的催吐萝芙木根粉，在1 L萃取釜中进行放大实验，萃取压力为35 MPa，萃取温度为50℃，夹带剂为每100g样品用25mL乙醇，萃取时间2 h，收集萃取产物。
取萃取产物18g与适量硅胶拌匀，加入硅胶柱中不断洗脱，分段收集洗脱液，同时进行薄层色谱检测，合并组分相同的馏分。减压浓缩，并用甲醇进行重结晶，过滤后再用丙酮洗至白色，放置过夜，得针状白色结晶。
2 结果与讨论
2.1 正交实验结果分析
根据选定的L9（34）正交表安排实验，并对结果进行极差分析，可以看出，各因素对催吐萝芙木中利血平提取率的影响程度依次为A>D>B>C，最优的萃取方案是A3D2B3C2，即:萃取压力35 MPa，萃取温度60℃，夹带剂为每100g样品用25 mL乙醇，萃取时间2 h。
2.2 最佳工艺验证实验
取200g粉碎的催吐萝芙木根粉按最佳工艺条件A3D2B3C2进行验证实验，测得利血平的提取率为0.0920％，大于正交实验的最大值，说明优化是成功的。
2.3 分离产物测试分析
所得晶体为白色针状结晶，无臭无味，遇光色渐变深。易溶于氯仿，微溶于丙酮、甲醇等有机溶剂。用薄层色谱检测，与标准品对照，斑点位置重合。
核磁共振波谱有下列各特征吸收峰HNMR（CDCl3,TMS内标），δ:1.82（1H，ddd，H-14α），1.91（1H，ddd，H-20），1.98（1H，ddd，H-19β），2.05（1H，dddd，H-15），2.32（1H，d，H-14β），2.35（1H，ddd，H—19β），2.48（1H，dd，H-21β），2.69（1H，dd，H-16），2.96（1H，ddd，H-6α），3.06（1H，dd，H-21β），3.19（1H，d，H-5β），3.92（1H，dd，H-17），4.51（1H，dd，H-3），5.05（1H，ddd，H-18），6.77（1H，d，H-10），7.32（1H，d，H-9），3.92（3H，s，OCH3），3.83（3H，s，OCH3），3.50（3H，s，OCH3），7.32（2H，s，H—27*2），7.61（1H，br s，N-H）。
APCI-MS：m／Z=609（M+）。
上述理化数据均与利血平对照品一致。
3 结论
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