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大蒜等12种中草药的体外抑菌实验

2009/11/3/10:14 来源:中国营销传播网

   【慧聪制药工业网】大蒜是人们日常饮食中的重要调味品,具有健胃开食、增进消化的功能,其辛辣成分大蒜素对多种病原菌及深部感染真菌有抑制作用[1,2],在禽类及水产养殖方面对养殖动物能起到防病保健和促进生长的作用[3,4];此外,大蒜还有良好的抗氧化作用,可加入食用油延长其保质期[5];在疾病预防方面,经常进食大蒜可以提高血浆及红细胞抗氧化性能[6],并能有效降低血压,预防动脉粥样硬化和心脑血管疾病[7,8];大蒜还可以抑制结肠癌细胞的生长[9],也可通过抑制硝酸盐还原细菌繁殖和亚硝酸盐合成预防胃癌的发生[10];除大蒜素外,大蒜还含有大蒜多糖等多种保健成分,可以和银杏叶制成天然保健饮料[11,12]。辣椒也是一种重要的日常调味品,有增进食欲和维持消化道正常菌群平衡的功能;辣椒碱对大肠杆菌、酵母等多种病原菌有抑制作用[13,14]。大蒜中大蒜素和辣椒中辣椒碱有抑菌作用,这并不排除大蒜、辣椒中其它抑菌成分的存在,也不能完全代表它们的抑菌性能。本实验对辣椒水煎剂和大蒜乙醇制剂的抑菌性能加以研究,以期完善这两种保健调味品的抑菌性能研究。黄柏、蒲公英等常见中草药常用于微生物性传染病的治疗,也可用作防病饲料添加剂,但它们对常见病原菌的抗菌谱及抗菌浓度尚不明确,限制了它们在中医药和饲料添加剂方面的应用。在此,我们探讨了大蒜、辣椒、黄柏等12种药用植物提取物对大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等常见病原菌的抗菌谱及最小抑菌浓度(MIC),希望能为它们的医药用途及生产应用提供科学依据。

    1材料与仪器

    1.1菌株和培养基大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为本实验室存留;大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌和枯草杆菌培养基为营养琼脂No.3,金黄色葡萄球菌培养基为葡萄球菌琼脂110和营养琼脂No.3。

    1.2仪器垂直流超净工作台,DH3600A型电热恒温培养箱,手提式高压灭菌锅,2D-85型恒温振荡器,TU-1800型紫外可见分光光度仪,ZD-85型恒温摇床,AB204-S基础型电子分析天平等。

    1.3中草药大蒜和辣椒购自农贸市场,其它中草药购自中药店。

    2方法

    2.1大蒜素提取物的制备将去皮大蒜100g捣碎研细,乙醇浸提,浸提液挥发浓缩至200ml,获得50%的大蒜浸提物,并用乙醇作二倍系列稀释。

    2.2辣椒、黄柏等煎剂类中草药提取物制备中草药粉碎过筛,进行干物质含量(DMC)测定;各中草药粉50g(以干物质量计)水煎制剂并浓缩至100ml,提取物浓度为50%,用水做二倍系列稀释。

    2.3药敏纸片抑菌实验[15]以6mm直径滤纸片在各中草药各稀释梯度浸提液中浸泡并晾干,置于涂有特定菌量的平板分区内,37℃过夜培养后记录各中草药提取物各稀释梯度对几种病原菌的抑菌情况,记录抑菌圈直径及最小抑菌浓度(MIC),各定性及定量抑菌实验均重复3次。

    2.4培养基对中草药抑菌效果的影响金黄色葡萄球菌分别涂布于营养琼脂No.3和葡萄球菌琼脂110,以药敏纸片法观察各中草药制剂对两种培养基上金黄色葡萄球菌的抑菌效果。

    2.5涂布菌含量的确定涂布菌原液制作10倍稀释梯度系列,以平板涂布法计算涂布菌液浓度。

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